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尼康顯微鏡使用全指南

更新時間:2025-08-06      點擊次數(shù):2166

尼康顯微鏡

 


  尼康(Nikon)顯微鏡以??精密光學(xué)設(shè)計、模塊化擴展性及智能軟件集成??著稱,廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、材料分析、工業(yè)檢測等領(lǐng)域。以下從核心系統(tǒng)、操作流程、智能功能到維護規(guī)范展開詳解,覆蓋主流型號。
 
  ??一、核心系統(tǒng)構(gòu)成與原理??
 
  ??1. 光學(xué)系統(tǒng):尼康核心技術(shù)壁壘??
 
  ??無限遠(yuǎn)校正光學(xué)系統(tǒng)(CFI)??
 
  所有物鏡、鏡筒、目鏡采用平行光路設(shè)計,消除像差,確保從中心到邊緣的均勻分辨力。
 
  典型配置:
 
  ??物鏡??:Plan Fluor(高透光率熒光)、APO CHROMAT(復(fù)消色差,用于多色成像)、WD 50mm長工作距離物鏡(工業(yè)檢測)。
 
  ??目鏡??:高眼點型(支持戴眼鏡用戶,視野直徑22mm)。
 
  ??多模式照明技術(shù)??

??照明類型??

??適用場景??

??關(guān)鍵配件??

??透射光柯勒照明??

病理切片、細(xì)胞觀察

鹵素?zé)?2V/100W + 綠色濾光片

??落射熒光??

GFP/RFP標(biāo)記樣品

汞燈/LED光源+多波段濾光塊

??微分干涉相襯??

活細(xì)胞無染色觀察

沃拉斯頓棱鏡+偏振器

??暗場??

納米顆粒、表面缺陷檢測

環(huán)形遮光器+拋物面聚光

 
  ??2. 機械系統(tǒng):精準(zhǔn)穩(wěn)定的基石??
 
  ??載物臺??:
 
  右手低手位載物臺:8mm調(diào)焦行程,適合教學(xué)。
 
  電動XYZ載物臺:行程200×200mm,重復(fù)定位精度0.1μm。
 
  ??調(diào)焦機構(gòu)??:
 
  粗微同軸旋鈕(每圈100μm微調(diào)),帶限位鎖防止物鏡碰撞。
 
  電動Z軸:納米級步進(jìn),支持3D層掃。
 
  ??3. 數(shù)字化擴展模塊??
 
  ??相機端口??:C接口(標(biāo)準(zhǔn))、FN接口(零像差中繼)。
 
  ??智能配件??:
 
  ??DS-Fi3相機??:2000萬像素CMOS,動態(tài)范圍78dB。
 
  ??NIS-Elements軟件??:驅(qū)動硬件聯(lián)控,支持多維實驗設(shè)計。

 


 
  ??二、標(biāo)準(zhǔn)化操作流程(以生物顯微鏡Eclipse E100為例)??
 
  ??第一步:光路初始化??
 
  1.打開電源,調(diào)節(jié)亮度旋鈕至50%。
 
  2.旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)盤至10×物鏡(避免高倍鏡接觸樣品)。
 
  3.置樣本于載物臺,夾持固定。
 
  ??第二步:柯勒照明校準(zhǔn)(關(guān)鍵!)?
 
  關(guān)閉現(xiàn)場光闌-調(diào)節(jié)聚光鏡高度至像清晰-開大孔徑光闌至80%-微調(diào)聚光鏡中心螺絲使光斑居中-打開現(xiàn)場光闌至剛好覆蓋視野
 
  ?注:此步驟確保無雜散光干擾,提升對比度30%以上。
 
  ??第三步:對焦與觀察??
 
  1.粗調(diào)旋鈕抬升載物臺至接近樣品。
 
  ??2.從目鏡觀察??,緩慢降載物臺至出現(xiàn)圖像(防碰撞!)。
 
  3.切換40×物鏡,用微調(diào)旋鈕精焦(細(xì)胞核紋理清晰為基準(zhǔn))。
 
  ??第四步:油鏡使用規(guī)范??
 
  1.在40×物鏡下找到目標(biāo)區(qū)域。
 
  2.轉(zhuǎn)開物鏡,在玻片滴??浸油1滴??(折射率n=1.518)。
 
  3.切換100×油鏡,輕旋微調(diào)至接觸浸油(??禁止粗調(diào)!??)。
 
  4.觀察后立即用??二甲苯棉簽??擦拭油鏡頭。
 
  ??三、智能高階功能實戰(zhàn)?
 
  ??1. 多維實驗自動化??
 
  ??時間序列拍攝??:設(shè)置間隔30秒拍攝,持續(xù)24小時(活細(xì)胞分裂研究)。
 
  ??Z軸層掃??:步進(jìn)1μm,掃描20層(3D腫瘤球模型重建)。
 
  ??2. 高級圖像分析??
 
  ??顆粒計數(shù)??:識別直徑>2μm的細(xì)胞器(置信度>95%)。
 
  ??熒光共定位分析??:計算Manders系數(shù)驗證蛋白相互作用。
 
  ??四、關(guān)鍵維護與故障排除??
 
  ??1. 日常維護表??

?部件??

??周期??

??操作規(guī)范??

光學(xué)表面

每次使用后

用??壓縮氣吹塵??,鏡紙蘸乙醇單向擦拭

機械導(dǎo)軌

每月

涂超薄潤滑油(型號:NT-1000)

汞燈壽命

200小時

重置計時器,避免爆炸性熄滅

 
  ??2. 常見故障處理??
 
  ??圖像模糊發(fā)虛??:
 
  檢查物鏡油污
 
  確認(rèn)蓋玻片厚度(標(biāo)準(zhǔn)0.17mm),過厚導(dǎo)致球差。
 
  ??熒光亮度衰減??:
 
  檢測汞燈壽命 → 更換新燈后做光強校準(zhǔn)。
 
  清潔熒光濾光塊(半年1次專業(yè)保養(yǎng))。
 
  ??五、應(yīng)用場景技術(shù)方案??
 
  ??案例1:細(xì)胞有絲分裂觀察
 
  ??配置??:相位差物鏡,環(huán)境控制艙。
 
  ??流程??:
 
  1.相位環(huán)匹配聚光鏡Ph1擋位。
 
  2.低光強時間序列拍攝。
 
  ??案例2:金屬晶粒度分析
 
  ??配置??:明場50×物鏡,偏振模塊。
 
  ??金相制樣??:
 
  研磨至1200#砂紙 → 金剛石拋光膏(0.5μm)拋光。
 
  4%硝酸酒精侵蝕10秒。
 
  ??軟件測量??:NIS-Elements晶界自動描跡,按ASTM E112標(biāo)準(zhǔn)計算晶粒度等級。


 

 

 


 
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